17 décembre 2019
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Coline Sivelle, « Conception et production d’anticorps anti-TNFa non immunogènes pour le traitement des maladies inflammatoires », Theses.fr, ID : 10670/1.3hbdpl
L’efficacité des anticorps anti-TNFα peut être particulièrement affectée par leur immunogénicité. Elle se traduit par la production d’anticorps dirigés contre la protéine thérapeutique (ADA) et induisant des effets indésirables. Pour l’adalimumab (Humira®), qui est l’anti-TNFα le plus utilisé, ce phénomène est observé chez plus de 30% des patients pour certaines pathologies. Les épitopes T responsables de cette immunogénicité sont principalement localisés dans les régions CDR impliquées dans l’interaction avec le TNFα. L’objectif de ce travail est de retirer les séquences épitopes T de l’anticorps sans altérer sa fonctionnalité. Afin de maitriser ce problème d’immunogénicité, ces travaux de thèse proposent d’utiliser le Yeast Surface Display (YSD) afin de contrôler la fonctionnalité de l’anticorps tout au long du processus de mutagénèse. Pour cela, une première étape de comparaison des différents formats d’expression d’anticorps en YSD a permis de définir le format d’affichage à utiliser pour la suite du projet. La stratégie de déimmunisation adoptée ensuite est basée sur la suppression des épitopes T. Dans un premier temps, elle réunit une approche de mutagénèse exhaustive (DMS) et l’utilisation d’algorithme afin d’identifier les substitutions délétères pour l’interaction HLA II/épitope T, mais neutre pour la fonction de l’anticorps. Dans un second temps, ces substitutions sont combinées dans des banques pré-enrichies en mutants fonctionnels. Des mutants ayant une immunogénicité potentielle réduite ont ensuite été sélectionnés à partir de ces banques. Plusieurs mutants de l’adalimumab à l’immunogénicité réduite selon l’algorithme de prédiction ont été identifiés et caractérisés. Ils possèdent tous une affinité augmentée pour le TNFα se traduisant par une activité au moins doublée par rapport à l’adalimumab.