Síntesis in vitro de la proteína de la envoltura del virus peruano de la Fiebre Amarilla

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2001

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Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública




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Carlos Yábar V. et al., « Síntesis in vitro de la proteína de la envoltura del virus peruano de la Fiebre Amarilla », Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública, ID : 10670/1.4elq2k


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"Objetivo: Sintetizar la proteína recombinante de la envoltura (Er) del virus peruano de la Fiebre Amarilla (FA) utilizandotécnicas moleculares. Materiales y métodos: El gen de la proteína de interés fue amplificado por transcripción reversa- reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) y clonado en un vector plasmídico para ser analizado mediantesecuenciamiento de ADN. El inserto de ADN fue subclonado en un vector de expresión para ser traducido a proteína. Sepurificó la proteína mediante cromatografía de afinidad bajo condiciones denaturantes, siendo visualizada porelectroforésis en SDS-PAGE. Resultados: Se sintetizó y purificó la pr E del virus de la FA. Presentó un peso de 66 kDa,y luego de tres horas de inducción a partir de 1x108 células (OD=0,5) se obtuvo 10 mg/mL de la proteína a miniescala.Conclusión: El análisis de la secuencia de aminoácidos demostró que Er podría ser un buen candidato a ser evaluadoserológicamente y luego ser usado como herramienta de diagnóstico específico para la FA."

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