Électrophorèse des lipoprotéines sériques (lipoprotéinogramme) par le kit Hydragel Lipo + Lp(a)® (Sebia) : évaluation de la coloration au Fat Red 7B

Résumé Fr En

Le lipoprotéinogramme (ou lipidogramme) consiste en une séparation électrophorétique des principales classes de lipoprotéines sériques. La séparation a été faite en gel d’agarose en utilisant le kit Sebia Hydragel Lipo + Lp(a)®. Une étude de répétabilité (n = 6) a été menée sur 3 sérums (1 normolipidémique, 1 hypertriglycéridémique et 1 présentant une Lp(a) élevée), la reproductibilité a été étudiée sur ces 3 sérums et sur un liquide d’ascite présentant des chylomicrons, pendant 6 jours (n = 6). Une approche quantitative a été faite par l’étude des aires sous la courbe et des pourcentages de fractions. Dans les deux cas (répétabilité et reproductibilité), la révélation des lipoprotéines dans le gel après migration électrophorétique a été faite soit par le colorant Noir Soudan (procédure recommandée par Sebia), soit par le Fat Red 7B. Quelle que soit la coloration, les études de répétabilité comme de reproductibilité montrent que toutes les fractions lipoprotéiniques étaient correctement détectées à leurs positions respectives, permettant de conduire à des interprétations satisfaisantes des lipoprotéinogrammes. Notre étude de reproductibilité a également permis de confirmer une bonne stabilité des fractions après 6 jours de conservation à +5 ± 3 ̊C. La coloration au Fat Red 7B conduit à un gain de temps technique (environ 40 min) pour les phases de séchage du gel et de coloration/décoloration, ce qui permet de répondre plus rapidement à certaines demandes urgentes telles que les diagnostics de chylothorax.

The lipoproteinogram (or lipidogram) consists in an electrophoretic separation of the main classes of serum lipoproteins. Separation was done in agarose gel using the Sebia Hydragel Lipo + Lp(a)® kit. A repeatability study (n=6) was conducted on 3 sera (1 normolipidemic, 1 hypertriglyceridemic and 1 with a high Lp(a) concentration). The reproducibility was studied on these 3 sera and on an ascites liquid containing chylomicrons, upon 6 days (n=6). A quantitative approach was made by studying areas under the curve and percentages of fractions. In both cases (repeatability and reproducibility), the revelation of the lipoproteins in the gel after electrophoretic migration was made either by staining with Sudan Black (procedure recommended by Sebia), or with Fat Red 7B. Regardless of staining, both repeatability and reproducibility studies show that all lipoprotein fractions were correctly detected at their respective positions, leading to satisfactory interpretations of lipoproteinograms. Our reproducibility study also confirmed a good stability of the fractions over 6 days (storage at +5 ± 3̊C). In addition, the Fat Red 7B staining leads to a shorter technical time (about 40 min) for the gel drying and staining/destaining phases, which allows us to respond more quickly to certain urgent requests such as chylothorax diagnosis.