Estandarización de una prueba de PCR para la detección de Brucella sp

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"Objetivo: Estandarizar una prueba de PCR para la detección de Brucella spp. Materiales y métodos: Se usóoligonucleótidos reportados que amplifican la secuencia de 16S rRNA de Brucella spp. Fueron evaluados dos métodos deextracción de ADN: fenol-cloroformo-alcohol isoamílico y un kit comercial basado en columnas con afinidad. Para determinarla sensibilidad de la prueba se usó 8 cepas peruanas de Brucella y para determinar la especificidad de la prueba se usóotras cepas bacterianas peruanas de E. coli, Shigella, Proteus mirabilis, Salmonella paratyphi, Salmonella typhi, Citrobacterfreundii y Vibrio cholerae. Resultados: Los 2 métodos de extracción de ADN evaluados fueron efectivos. La sensibilidadanalítica de la prueba es alta, lográndose detectar 80 femtogramos de ADN de Brucella spp. purificado. Todas las cepasperuanas de Brucella spp. fueron detectadas por la prueba. Además, la prueba es negativa para cepas peruanas de otrasespecies bacterianas. Conclusión: Se ha estandarizado las condiciones de una prueba de PCR para la detección decepas peruanas de Brucella spp., la cual es muy sensible y específica en el laboratorio."